Chuẩn bị và nghiên cứu các kháng thể IgY chống lại cơ sở chung của Metallase từ Agkistrodon halys Venom

[Tóm tắt] [Mục tiêu] Để chuẩn bị kháng thể IgY chống lại mô-đun chung của metallicoproteinase từ nọc độc của Agkistrodon acutus và để nghiên cứu ảnh hưởng của nó đối với hoạt động của nọc rắn [Phương pháp] Bằng cách phân tích trình tự phổ biến của các metallicoproteinase khác nhau từ nọc độc của Agkistrodon acutus, chúng tôi đã thiết kế và tổng hợp các peptide kháng nguyên được bảo tồn cao PT1 và PT2, có liên quan chặt chẽ đến hoạt động của enzyme;Gà mái được gây miễn dịch bằng hợp chất liên hợp KLH-PT1 và KLH-PT2 để thu được kháng thể IgY.Hiệu giá của IgY và các đặc điểm phản ứng chéo với Agkistrodon acutus và nọc Agkistrodon acutus đã được nghiên cứu bằng ELISA và Western blot;Cuối cùng, hoạt động trung hòa của IgY được đánh giá bằng thử nghiệm chống xuất huyết dưới da ở chuột [Kết quả] Kết quả của ELISA và Western blot cho thấy IgY kháng KLH-PT1 và kháng Agkistrodon acutus có thể phản ứng chéo với Agkistrodon acutus và nọc độc Agkistrodon acutus và cái sau mạnh hơn đáng kể so với cái trước;Anti-KLH-PT2 IgY không có phản ứng chéo rõ ràng với nọc độc Agkistrodon acutus và nọc độc Agkistrodon acutus trong ống nghiệm, nhưng có độc tính trung hòa mạnh trong thí nghiệm chống chảy máu in vivo và vượt trội hơn đáng kể so với hai loại trước [Kết luận] IgY kháng thể có thể phản ứng chéo với nhiều loại nọc rắn lưu hành trong máu khác nhau đã được điều chế bằng cách thiết kế chuỗi kháng nguyên peptide phổ biến của metallicoproteinase, đặt nền tảng cho việc điều chế kháng thể nọc rắn đặc hiệu, hiệu quả, ít độc tính và phổ rộng chống xuất huyết